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以下是?人補體因子H(CFH)ELISA試劑盒?的實驗使用說明書核心內容:
BS-0638人補體因子H(CFH)ELISA試劑盒
一、實驗原理
采用?雙抗體夾心法?:
微孔板預包被抗人CFH抗體捕獲樣本中的CFH
加入HRP標記的檢測抗體形成復合物
TMB顯色(藍色→黃色),450nm測OD值,濃度與吸光度正相關
二、試劑盒組成
組分 規格(96T/48T) 保存條件
預包被微孔板 1×96孔/1×48孔 2-8℃
CFH標準品(凍干) 0.5mL×6管(0-40ng/mL) -20℃
HRP標記抗體 6mL/3mL 2-8℃
TMB底物 9mL/6mL 避光4℃
20×洗滌緩沖液 25mL/15mL(需1:20稀釋) 室溫
三、樣本處理
血清/血漿?:3000×g離心10-20分鐘,避免溶血或脂血
組織勻漿?:生理鹽水研磨后離心取上清
保存要求?:-20℃分裝,避免反復凍融(≤3次)
四、操作步驟
平衡試劑?:所有組分室溫平衡20分鐘
標準品復溶?:加0.5mL稀釋液溶解凍干標準品
加樣溫育?:
依次加入標準品/樣本50μL→檢測抗體50μL
37℃孵育60分鐘
洗滌?:手工洗板5次(每孔加滿洗滌液靜置1分鐘)
顯色?:加入TMB 100μL,避光反應15分鐘
終止?:加終止液50μL,10分鐘內測OD450nm
五、注意事項
靈敏度?:1.88-8.54ng/mL(不同品牌差異)
精密度?:板內CV<10%,板間CV<15%
干擾因素?:避免細菌污染、反復凍融或劇烈震蕩樣本
失效判斷?:陰性對照OD值≥0.12需棄用
六、結果計算
以標準品濃度為橫坐標,OD值為縱坐標繪制曲線,樣本濃度需乘以稀釋倍數。建議使用生工生物或艾美捷科技等供應商提供的專業分析軟件。
注:不同品牌試劑盒參數可能存在差異,請以實際隨貨說明書為準。
注:以上資料僅供參考,具體詳情來咨詢技術 老師或品牌供應商。
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