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以下是?人抗著絲點抗體(ACA/CENP) ELISA試劑盒?的實驗使用說明書核心內(nèi)容，綜合整理自多個供應(yīng)商的標(biāo)準(zhǔn)化操作流程：
BS-1458人抗著絲點抗體(ACA/CENP)ELISA試劑盒
一、實驗原理?
采用雙抗體夾心法(固相ELISA)，通過生物素標(biāo)記的抗體與ACA/CENP結(jié)合，再經(jīng)HRP標(biāo)記的親和素催化底物顯色，顏色深度與樣本中ACA/CENP濃度成正比。
二、試劑盒組成?
組分 96T規(guī)格 48T規(guī)格 保存條件
酶標(biāo)板 12孔×8條 6孔×8條 2~8℃
標(biāo)準(zhǔn)品(400ng/ml) 0.6ml 0.3ml 需稀釋后使用
生物素標(biāo)記抗體 6ml 3ml 即用型
HRP-親和素 10ml 5ml 避光保存
底物A/B 各6ml 各3ml 避光(B液對光敏感)
終止液 6ml 3ml 腐蝕性，需密封
三、樣本處理?
血清/血漿?：
室溫凝固10-20分鐘，離心(2000-3000rpm，20分鐘)取上清，避免反復(fù)凍融。
抗凝劑推薦EDTA或肝素，避免溶血。
細(xì)胞上清/組織勻漿?：離心去除顆粒物，稀釋至線性范圍內(nèi)。
四、操作步驟?
包被與孵育?：
標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋后加入微孔板，每孔100μl，設(shè)空白對照(僅加稀釋液)。
37℃孵育60分鐘，洗滌3次(拍干，避免交叉污染)。
抗體反應(yīng)?：
加生物素標(biāo)記抗體50μl，37℃孵育30分鐘，洗滌。
加HRP-親和素100μl，避光孵育30分鐘。
顯色與終止?：
加TMB底物100μl，避光反應(yīng)15-20分鐘，顯藍(lán)色。
加終止液100μl，黃色為最終顏色，30分鐘內(nèi)測OD450nm(參考630nm扣除背景)。
五、注意事項?
安全操作?：
避免皮膚接觸終止液和底物B，操作時佩戴手套。
使用一次性吸頭，金屬加樣器可能干擾結(jié)果。
質(zhì)量控制?：
標(biāo)準(zhǔn)曲線R2應(yīng)≥0.99，樣本S/N值≥2.1判為陽性。
不同批次試劑不可混用。
六、技術(shù)支持?
部分供應(yīng)商提供免費代測服務(wù)及實驗問題指導(dǎo)(如上海一研、森貝伽)。
完整英文說明書需聯(lián)系供應(yīng)商獲取。
如需具體品牌試劑盒的差異說明或優(yōu)化方案，可進(jìn)一步提供供應(yīng)商名稱以便細(xì)化。
注：以上資料僅供參考，具體產(chǎn)品信息請咨詢技術(shù)老師或品牌供應(yīng)商。
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