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BUNSEN本生資訊|牛血清:快問快答
市面上用于細胞培養的血清主要分為幾類?
目前市面上用于細胞培養的血清主要分為四種類型:胎牛血清(FBS)、新生牛血清(NBCS)、小牛血清(CS)成牛血清(ABS),而胎牛血清因未接觸外界所含的抗體、補體等對細胞有害的成分相對較少,含胚胎發育必須生長因子等。
血清名稱 縮寫 采集時間 采集方法
胎牛血清 FBS 在母牛懷孕 5~8 個月 胎牛心臟密閉穿刺采血獲取的血潔
新生牛血清 NBCS 出生 12~24 小時未進食新生牛 靜脈采血,亦有頸動脈采血
小牛血清 CS 出生后 2 周至1年內的小牛 靜脈取血
成牛血清 ABS 成牛 收集全血分離得
如何在外觀上一眼區分血清好壞?
淡黃色,透明——2小時以內的國產新生牛血清,膽紅素含量較少;
金黃色,透明——產下較長時間的新生牛血清,一般超過2小時了;
金黃色,不透明——產下幾天或更久的小牛血清;
淡黃色,帶一點微紅,透明——等級最高的胎牛血清;
淡紅色,透明——普通的胎牛血清;
紅色偏深,透明——普通的胎牛血清,采血環節不夠嚴謹;
紅色偏暗,透明——普通胎牛血清,保存不好,血紅蛋白氧化了;
紅色,不透明——小牛血清,透明度越差,牛齡越大。
正常情況下,融化后血清的外觀顏色應該是?
血清為動物來源,成分復雜,不同批次間會存在一些外觀上的差別。一般情況下,它們的顏色可能是金黃色、紅色、琥珀棕色或者是介于三者之間。
血清應如何融解?
從冰箱中取出血清,放于2-8℃融化,融化過程中不時旋轉(swirling mix)混勻。充分融解后分裝或平衡到室溫后使用。
為什么有時血清中出現絮狀沉淀?是否需要去除?如何去除?
多種原因可能導致絮狀沉淀的形成,最常見的原因之一是融化過程中,脂蛋白聚集所致。該現象一般不會影響產品質量。可以400g離心5分鐘,取上清,然后過濾。根據需要選擇合適的濾膜孔徑,一般常用的是0.22um PES材質的濾膜。為避免濾膜阻塞,建議離心后取上清加入培養基內一起過濾而不是直接過濾血清。
為什么存放于冰箱中的血清會出現沉淀?如何避免該現象?
在2-8°C條件下存放,血清中的多種蛋白或脂蛋白會形成肉眼可見的沉淀,如血纖蛋白(fibrin),單體時處于溶解狀態,在凍融過程中會發生聚集,形成肉眼可見的沉淀。但該現象一般不會影響血清的性能。可以400g離心5分鐘,取上清,然后過濾。根據需要選擇合適的濾膜孔徑,一般常用的是0.22um PES材質的濾膜。為避免濾膜阻塞,建議離心后取上清加入培養基內一起過濾而不是直接過濾血清。為盡量避免出現上述現象,建議血清分裝成一次性用量存于-15°至-20℃冰箱,避免反復凍融和融化后的血清在2-8°C條件下長時間放置。
如何應對血清的批間差?
全球康血清產品通過嚴格的質控盡可能縮小批間差,但由于血清本身的特點和來源,無法避免批間差。客戶可以通過做預測試等方式,選擇可滿足要求的血清批次。
注:以上資料僅供參考,不同品牌產品可能存在設計差異,操作前建議參考說明書?。
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